近日，經(jīng)過兩個多月的漫長等待，一份特殊的"親子鑒定"報告出爐，13頭克隆小豬與"代孕"母親無血緣關(guān)系，僅與供體細胞存在"親子關(guān)系"。這從醫(yī)學(xué)上證明了，世界首例機器人操作的體細胞克隆豬在中國天津誕生。

經(jīng)過110天孕育，4月26日、29日，兩頭普通的"代孕"母豬先后順利產(chǎn)下了13頭健康的純種小長白豬。較之以往"手工操作"克隆技術(shù)，此次機器人的自動化"操刀"，用力更小，對細胞傷害更少，更高精度的操作將體細胞克隆技術(shù)成功的關(guān)鍵指標"囊胚率"從10%提高至20%。這一數(shù)據(jù)令全球同行驚訝不已。

"機器人操作體細胞克隆豬"研究來自南開大學(xué)機器人所趙新教授領(lǐng)導(dǎo)的跨學(xué)科研究團隊，天津市畜牧獸醫(yī)研究所是主要合作單位。南開大學(xué)機器人所研發(fā)多年的"面向生物醫(yī)學(xué)工程的微操作機器人系統(tǒng)"，曾獲2002年度國家技術(shù)發(fā)明二等獎。此次克隆豬的誕生，也是時隔15年后，該技術(shù)獲得的又一重大突破。

體細胞克隆是改良生物品種的經(jīng)典方法之一。它將普通品種卵母細胞的細胞核去除后，注入優(yōu)良品種的體細胞。這種方法的優(yōu)勢在于獲得的后代一定是優(yōu)良品種。然而，成功率極低，成為體細胞克隆技術(shù)發(fā)展的瓶頸。

"作為最復(fù)雜的微操作之一，體細胞克隆技術(shù)急需實現(xiàn)機器人化。通過機器人化體細胞核移植操作，提高后續(xù)細胞培養(yǎng)成功率，進而提高整個體細胞克隆技術(shù)的成功率，是我們面臨的真正挑戰(zhàn)。"趙新說。

針對上述問題，南開大學(xué)研究團隊面向生命科學(xué)發(fā)展需求展開科研攻關(guān)，研制出具有可視化、微創(chuàng)化、定點化、定量化功能，集檢測分析與操作于一體的原位顯微分析與操作儀，利用該儀器實現(xiàn)了機器人化的細胞核移植流程。

據(jù)介紹，基于機器人微操作的體細胞克隆技術(shù)的關(guān)鍵難點在于，如何最大限度地減少對細胞的傷害。南開大學(xué)團隊設(shè)計并實現(xiàn)了機器人化的細胞核移植流程，包括卵母細胞撥動尋找極體、抽核和體細胞注入三部分。

科研人員通過分析微操作工具與細胞接觸過程中的細胞受力情況，分別實現(xiàn)了基于最小力的細胞撥動與抽核，保證了細胞核移植操作過程中細胞受力最小。"手動操作撥動細胞，細胞最大變形30至40微米，經(jīng)過計算后的機器人操作細胞最大變形降低至10到15微米。如果以往的力度是'一記重拳'，那么現(xiàn)在就是'輕輕一推'。"趙新介紹，該微操作系統(tǒng)采用基于平衡壓模型的操作，也讓抽取細胞核的過程更加"可控""溫柔"。

實驗結(jié)果表明，基于最小力的細胞撥動方法顯著減少了對細胞的傷害;后續(xù)細胞培養(yǎng)表明，與人工操作相比，基于最小力的細胞抽核操作，細胞后續(xù)發(fā)育率顯著更高。

"最令人興奮的是，在體外實驗中我們采用這套微操作平臺對53個卵母細胞進行核移植，其中11個重構(gòu)胚發(fā)育成為標志著克隆成功的囊胚，發(fā)育率達到21%。而此前體細胞克隆的囊胚率始終維持在10%左右。"趙新說。

為了讓這項技術(shù)"開花結(jié)果"，南開大學(xué)科研團隊，將該核移植方法應(yīng)用于整個克隆豬流程，先后完成了數(shù)千例核移植操作，來驗證方法的有效性。2017年1月初，分四批完成了510例核移植操作，并將這510枚克隆胚胎移植到6頭母豬體內(nèi)。最終，兩頭母豬順利受孕，并與4月26、29日分別產(chǎn)下7頭、6頭，共計13頭健康的克隆豬。

"我們的研究第一次從細胞的發(fā)育角度指導(dǎo)微操作，通過細胞受力將微操作過程與細胞發(fā)育結(jié)果建立聯(lián)系。這套方法的推廣可進一步提高微操作技術(shù)對整體生物過程的貢獻。可以預(yù)見，在輔助生育、動植物品種改良以及大眾醫(yī)療、家畜生產(chǎn)等領(lǐng)域具有很好的應(yīng)用前景。"趙新說。

據(jù)了解，該項目獲得國家重大科研儀器研制專項、"863"計劃先進制造領(lǐng)域、天津市智能機器人重大科技專項支持。(張道正吳軍輝)

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